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  Problèmes posés par la purification des neurotoxines animales (Neurotoxines des venins de scorpions)
  Annales de l’Université de Madagascar - Médecine et Biologie, volume 9, 1967 pp:3 - 59

  Auteur(s) : Miranda F., Rochat H., Rochat C., Lissitzky S.

  Auteur correspondant :

  Mots-clés : SCORPIONS/ANDROCTONUS/VENIN/NEUROTOXINE/EXTRACTION (CHIMIE)/PURIFICATION/CHROMATOGRAPHIE
  
  

  Résumé de l’article

  [FR] Après avoir dans des travaux antérieurs, isolés à partir des venins de scorpions, deux entités chimiques bien définies : les toxines I et II, nous avons entrepris l’étude de certaines formes aberrantes de toxines existant dans les extraits riches en protéines étrangères : broyats de telson, extraits totaux de venins, à l’aide de méthodes chromatographiques et électrophorétiques. A partir de ce type d’extraits, il est très difficile d’isoler la toxine II : seul l’extrait total du venin d’Androctonus permet d’en récupérer une très faible quantité (1%). Corrélativement se manifestent des formes aberrantes de toxines dont la purification et l’identification s’avèrent très difficiles. Une méthode intéressante pour obtenir ces formes dans un état de purification avancée est la chromatographie sur DEAE-Sephadex en tampon acétate d’ammonium 0,1 M de pH : 8,47 qui permet d’isoler deux fractions toxiques : la fraction A qui contient les formes aberrantes et la fraction B qui conduit rapidement à l’obtention de toxine I dans un état homogène. Les formes aberrantes de toxines semblent être constituées par l’association de ces dernières avec des protéines étrangères par des liaisons de type polaire donnant des complexes moléculaires plus ou moins bien définis.

  [MG]

  [EN] Previous studies have led to the isolation of two neurotoxins (I and II) from the venom of each of two North-African Scorpions. The purity of the toxins obtained has been confirmed by several criteria of protein homogeneity and this knowledge has permitted the study of their behavior in the presence of other proteins usually found in the glands. The resulting aberrant forms of the toxins have been studied by ion-exchange chromatography on Amberlite CG-50 or DEAE-Sephadex and by disc electrophoresis on polyacrylamide gels in the presence of 8M urea. Multiple examples of aberrant forms of the toxins were noted during the purification of gland extracts and toxin II disappeared completely no matter which technique was used in the attempted isolation. Chromatography of gland extracts on DEAE-Sephadex A-50 in 0,1 M ammonium acetate pH 8,47 gives a better yield of toxin than chromatography on Amberlite. The first fraction eluted from DEAE-Sephadex, fraction A, contains the aberrant forms of the toxins. A toxin could be obtained readily from the second fraction (fraction B). This substance is similar in specific toxicity and homogeneity to the toxin I previously isolated from venom. The same chromatographic techniques applied directly to crude venom produce similar results. The aberrant forms observed are probably the consequence of non specific association of the toxins with contaminating proteins. This association with other proteins might be related to the high content of ionizable groups in the toxins.

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